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ELISA载体的形状主要有三种
2019.07.03   点击240次

固相载体在ELISA测定过程中作为吸附剂和容器,不参与化学反应。可作ELISA中载体的材料很多,*常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有较强的吸附蛋?#23383;?#30340;性能,抗体或蛋?#23383;?#25239;原吸附其上后?#21592;?#30041;原来的免疫学活性,加之它的价格低廉,所?#21592;?#26222;遍采用。聚苯乙烯为塑料,可制成各种形式。

ELISA载体的形状主要有三种:微量滴定板、小珠和小试管。以微量滴定板最为常用,专用于EILSA的产品称为ELISA板,上标准的微量滴定板为8×12的96?#36164;健?#20026;便于作少量标本的检测,有制成8联孔条或12联孔条的,放入座架后,大小与标准ELISA板相同。ELISA板的特点是可以同?#33519;?#34892;大量标本的检测,并可在特制的比色计上迅速读出结果。现在已有多种自动化仪器用于微量滴定板型的ELISA检测,包括加样、洗涤、保温、比色等步骤,对操作的标准化极为有利。聚苯乙烯经射线照射后,其吸附性能特别是对免疫球蛋白的吸附性能增加,应用于双抗体?#34892;?#27861;可使固相上抗体量增多,但用于间接法测抗体时空?#23383;到?#22823;。

良好的ELISA板应该是吸附性能好,空?#23383;?#20302;,孔底?#35813;?#24230;高,各板之间、同一板各?#23383;?#38388;、同一板各?#23383;?#38388;性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工艺的差别,各种产品的质量差异很大,因此,每一批号的ELISA板在使?#20204;?#39035;事先检查其性能。

常用的检查方法为:以?#27426;?#27987;度的人IgG(一般为10ng/ml)包被ELISA板各孔,洗涤后每孔内加入?#23454;?#31232;释度的酶标抗人IgG抗体,保温后洗涤,加底物显色,终止酶反应后,?#30452;?#27979;每孔溶液的吸光度。控?#21697;?#24212;条件,使各孔读数在吸光度0.8左右。计算全部读数的平均值。所有单个读数与全部读数的均数之差,应小于10%。

与聚苯乙烯类似的塑料是聚氯乙烯。作为ELISA固相载体,聚氯乙烯的特点为质软板薄,可剪割,价廉,但光洁度不如聚苯乙烯板,孔底亦不如聚苯乙烯平整。聚氯乙烯对蛋?#23383;?#30340;吸附性能?#26579;?#33519;乙烯高,但空?#23383;?#20063;略高。

为比较不同固相在某一ELISA测定中的优劣,可应用如下的试验:用其他免疫学测定方法选出一个典型的阳?#21592;?#26412;和阴?#21592;?#26412;,将它们进行一系列稀释后,在不同的固相载体上按预定的ELISA操作步骤进行测定,然后比较结果。在哪一种载体上阳性结果与阴性结果差别,这种载体就是这一ELISA测定项目的*合适的固相载体。

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